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胎牛血清选择指南

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胎牛血清的选择指南

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胎牛血清是细胞培养中常用的补充剂,含有丰富的生长因子、营养物质和激素等成分,能为细胞生长和分裂提供支持。在选择胎牛血清时,需综合多方面因素进行考量,以确保其满足实验需求,保障细胞培养的顺利进行。

胎牛血清的分类及适用场景

胎牛血清根据不同的标准可分为多个等级,不同等级的血清适用的细胞培养场景有所不同。

干细胞专用胎牛血清:经过细胞培养检测,适用于胚胎干细胞、间充质干细胞、昆虫细胞、神经类细胞等对血清质量要求极高的细胞培养。

特级胎牛血清:适用于对血清质量要求较高的细胞培养,如BeWo、Vero、Caco-2等细胞。

优等胎牛血清:适用于对血清质量有一定要求的细胞培养,如HepC2、RAW264.7、HacaT等细胞。

胎牛血清的关键选择指标

选择优质胎牛血清主要可从外观、沉淀、澄清度以及各项检测指标等方面入手。

外观:根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色。国产的血清呈现出蜡黄;进口的血清,质量好的呈现出淡黄、微红色,差点的呈现出橘红色或鲜红色。热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。血红蛋白含量的高低能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。

沉淀:进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀,这种沉淀对血清质量没有任何影响。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀。

澄清度:进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡;而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,将两者进行对比,可容易分辨。

检测指标:血清出厂前需进行严格检测,符合规定数值方能出厂。PH应在6.7-8.2之间;渗透压在260-340mosm/kg之间;血红蛋白含量不高于20mg/dL;白蛋白含量在14-34g/L之间;IgG不高于250μg/mL;内毒素含量应尽量低,因为过高含量的内毒素对细胞培养影响巨大,容易导致细胞亚健康,造成数据不准,或细胞状态不良、老化、甚至死亡;无菌检测(包括厌氧菌、好氧菌、真菌以及支原体)和病毒检测结果均应为阴性。

胎牛血清的热灭活考量

部分实验可能要求对胎牛血清进行热灭活以减少可能存在的补体等免疫活性成分,热灭活血清的目的是去除血清中的补体等对热敏感的物质,以避免补体对细胞的不良影响(如细胞溶解、平滑肌收缩等)。但需要注意的是,热灭活会影响血清中的生长因子活性,因此应视实验需求而定。在免疫学研究、培养胚胎干细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时可能是必要的,然而对于大多数细胞培养,热灭活并非必需。

不同等级胎牛血清的对比选择

特级胎牛血清和优级胎牛血清是常见的两种类型,它们在多个方面存在差异,选择时需根据实验需求和成本综合考虑。

内毒素含量:特级胎牛血清内毒素含量极低,优级胎牛血清的内毒素含量稍高,但仍然较低。

质量控制:特级胎牛血清会进行内毒素、血红蛋白、蛋白质含量等多项指标的严格检测,在过滤次数和检测项目上更为严格;优级胎牛血清虽然也经过严格的质量控制,但在一些细节上可能不如特级胎牛血清严格。

适用场景:由于其极低的内毒素含量和高品质的特点,特级胎牛血清适用于对血清质量要求极高的细胞培养实验,如干细胞培养、胚胎干细胞培养、原代细胞培养及部分癌细胞培养等;优级胎牛血清由于其内毒素含量较低且价格相对实惠,更适合用于常规的细胞系培养和传代,这些实验对血清质量的要求相对较低。

成本考虑:特级胎牛血清价格相对较高,优级胎牛血清价格更为亲民。对于需要高品质血清的细胞培养实验,如干细胞治疗和原代细胞培养,特级胎牛血清是更好的选择;对于大多数常规细胞培养实验,如细胞增殖和传代,优级胎牛血清是一个性价比更高的选择。

在选择胎牛血清时,应全面了解其分类、关键指标、热灭活需求以及不同等级的特点,结合具体的实验需求、细胞类型和成本预算等因素,做出合适的选择,以确保实验的成功和数据的准确性。


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